Фрагментация эмбриона при эко что это

Классификация эмбрионов при ЭКО

Несмотря на старания ученых и практикующих репродуктологов, до сих пор не удается приблизиться к тому, чтобы практическая каждая попытка экстракорпорального оплодотворения заканчивалась родами. Поэтому возникает резонный вопрос – на что влияет качество эмбрионов при ЭКО, как его оценить, какие предпринять дальнейшие действия и процедуры.

Что такое качество ооцита?

Сразу после того, как получены женские и мужские половые клетки, начинается оценка их качества по морфологическим признакам. Это важно для того, чтобы эмбриолог принял правильное решение о методе оплодотворения – ЭКО или интрацитоплазматическая инъекция (ИКСИ).

Ооцит (женская половая клетка) может иметь разную степень готовности к оплодотворению. Поэтому различают следующие виды яйцеклеток – незрелые, зрелые, дегенеративные и разрушенные. Класс ооцита определяют по состоянию генетического материала в ядре клетки. Зрелые яйцеклетки, которые можно оплодотворять, имеют первое полярное тельце (такие клетки обозначаются М II).

Незрелые яйцеклетки оплодотворению не подлежат. Обычно процесс созревания женской гаметы прерывается на более ранней стадии мейотического деления вследствие внутренних или внешних причин, а также в результате неправильного введения триггера (например, хорионического гонадотропина в цикле ЭКО).

Плохое качество яйцеклеток при ЭКО – причины

Качество эмбрионов при ЭКО, с одной стороны, определяется качеством генетического материала яйцеклетки, а с другой – качеством материала сперматозоида. Причинами плохого состояния женских половых клеток могут быть следующие факторы:

Помимо внешних причин, которые рассмотрены выше, на исход беременности влияет также качество эмбриона, а не только половых клеток, из которых он состоит. Это так называемые эмбриональные факторы, роль которых высока не только при искусственном оплодотворении, но и при естественном зачатии. Так, почти 50% самостоятельных зачатий завершаются прерыванием, при этом женщина даже не догадывается об этом состоянии ввиду отсутствия задержки месячных. В большинстве случаев причиной таких сверхранних потерь беременности являются хромосомные патологии эмбриона. Как правило, они не совместимы с жизнью, поэтому и происходит их естественная гибель.

В рамках ЭКО выявить подобные состояния помогает предимплантационная диагностика, при которой исследуется хромосомный набор эмбриона перед его введением в полость матки. Проводится не всем парам, а только при наличии показаний.

Так же при развитии эмбрион может остановиться на любой стадии оплодотворения. Одной из причин может быть иссечение внутренних запасов женской гаметы, а образовавшийся эмбрион не может еще продуцировать питательные вещества, поэтому погибает.

Классификация эмбрионов по качеству ЭКО

Классификация эмбрионов по качеству при ЭКО основана на оценке ряда факторов:

Традиционно принято выделять несколько вида эмбрионов при ЭКО с учетом времени их развития. Однако это не единственный критерий, важный при применении методов вспомогательной репродукции. Существует еще классификация эмбрионов по качеству при ЭКО, которая также зависит от «возраста» зародыша.

Формирование зиготы- первые сутки развития

Примерно через 16-20 часов после соединения яйцеклетки со сперматозоидом инициируется эмбриональное развитие, о чем говорит появление пронуклеусов (шифруется в протоколе ЭКО как pN). Эти структуры соответствуют генетическому материалы полученному от родителей, в норме их два, один от матери и один от отца.
качества эмбрионов при ЭКО в первые сутки выглядит следующим образом:

В классификации эмбрионов при ЭКО используются буквенные и числовые обозначения. Так, число указывает на количество клеток (бластомеров), а буква латинского алфавита – на их качество:
.
Хорошими эмбрионами на третьи сутки развития считаются те, которые имеют более 5 бластомеров, качество которых соответствует категории А и В.

В оценке «трехдневок» один из главных критериев – это степень фрагментации эмбрионального материала. Эта классификация предполагает выделение 4 подтипов:

Начиная с 3 суток Эмбрионы можно заморозить, чтобы использовать при последующих ЭКО. Криоконсервация позволяет проводить подсадку в цикле без стимуляции яичников гормональными препаратами, а это повышает шансы успешного развития беременности и последующих родов.

Компактизация до стадии морулы – с третих по пятые сутки развития.

С конца третьих суток между клетками зародыша постепенно стираются границы. Этот процесс называется компактизацией и знаменует начало формирования морулы.

Оценка состояния эмбриона на данном этапе развития не используются, т.к. малоинформативны. Единственное, что можно оценить – есть компактизация или нет.

Образование и рост бластоцисты – с четвертых по седьмые сутки развития.

С 4-х суток начинает формироваться бластоциста. Классификация эмбрионов выглядит несколько иным образом. В расчет берутся следующие критерии:

Расшифровка оценки эмбрионов при ЭКО в этом случае такова:

Начиная со стадии бластоцисты, развитие эмбриона должна уже осуществляться в матке. Для этого должен пройти хетчинг, который условно можно сравнить с процессом «вылупления из яйца», когда разрушается наружная оболочка, выполняющая роль «скорлупы».

Как улучшить качество эмбрионов при ЭКО?

Чтобы еще до вступления в программу ЭКО улучшить качество будущих эмбрионов, пара проходит расширенную диагностику. При выявлении различных отклонений от нормы проводится их коррекция. Помимо этого, назначается предгравидарная подготовка, в которую входят препараты фолиевой кислоты, омега-3 кислоты, йод и другие минералы, витамины.

В репродуктивном центре «СМ-Клиника» оказывается полный спектр услуг в рамках методов вспомогательной репродукции, подготовки к предстоящей беременности и ее ведению. В клинике внедрены современные протоколы, что позволяет добиваться высоких показателей эффективности ЭКО. Записывайтесь на прием и становитесь родителями здоровых малышей!

Источник

Оценка качества эмбрионов в программах ЭКО

Несмотря на то что результативность программ ЭКО зависит от множества факторов, главным и решающим этапом, практически определяющим успешность программы, является эмбриологический. А так как различные манипуляции с эмбрионом человека – это передний край современной науки, можете представить себе сложность терминологии, которую используют эмбриологи в своей повседневной деятельности. Ясности не добавляет и обилие различных классификаций и методов оценки качества используемых клеток.

Мы постараемся доступным языком объяснить, что подразумевается под непонятными сочетаниями букв и цифр и дать понимание того, на основе каких данных врачи принимают решения и дают прогнозы на исход программ ЭКО.

Главный эмбриолог, к.б.н.

Хотим сразу предупредить — ни в коем случае не стоит забывать, что для того, чтобы самостоятельно оценить перспективы и принять решение о переносе эмбриона нужно быть настоящим специалистом, имеющим помимо специального образования достаточный опыт.

В каждом конкретном случае решение и прогноз основывается на совокупности всех известных данных и чаще всего является коллективным решением врача и эмбриолога. Главная сложность состоит в том, что каждому этапу развития эмбриона соответствует своя система оценки качества и способ записи этой оценки. И для того чтобы понимать обозначения вроде «8с» необходимо хотя бы немного разобраться в содержании этих этапов и сопутствующих терминах.

День первый

На первом этапе эмбриолог оценивает признаки оплодотворения после проведенной процедуры ЭКО, ИКСИ, ИМСИ или PICSI. На этом этапе в эмбрионе оценивают наличие, количество, симметричность, внутреннее строение и внешний вид пронуклеусов.

Пронуклеусы — это ядра мужской и женской половых клеток еще не слившихся и несущих одинарный набор хромосом.

По их количеству и внешнему виду оценивают жизнеспособность эмбриона и перспективы возникновения патологий. В норме их должно быть два, они должны иметь относительно равные размеры, находиться рядом и иметь внутри «ядрышки» — пронуклеоли тоже в определенном количестве и расположенные определенным образом. На этом этапе может формироваться множество патологий, например, при присутствии только одного пронуклеуса оплодотворение и не сможет произойти, ведь именно это образование и есть носитель генетического материала, а без участия противоположного пола размножаться мы еще не научились. Пронуклеусов может оказаться и три. Такие эмбрионы часто несут аномальный, тройной набор хромосом и нежизнеспособны. Обычно они погибают до имплантации (прикрепления к стенке матки) или приводят к замершей беременности. Такие эмбрионы отбраковываются и не используются в программах ЭКО.

День второй

Вторые сутки знаменуются соединением ядер женской гаметы и мужской, а также процессом дробления зиготы, которая на этой стадии становится эмбрионом. Численность бластомеров (эмбриональных клеток) – 2–4, но их объем не увеличивается.

Дробление эмбрионов оценивается специалистом по таким критериям:

Уровень фрагментации и численность бластомеров классифицируется по типам следующим образом:

Самый качественный эмбрион — 4А, где 4 — количество бластомеров, А — отсутствие фрагментации.

Эмбрион на второй день

День третий

Продолжается дробление эмбриона, у которого насчитывается от 4 до 9 бластомеров. В начале третьего дня развития запускается собственная генетическая программа, которая в некоторых случаях содержит «опечатки». До этого эмбрион для своего роста «пользуется» веществами, накопленными яйцеклеткой во время ее созревания. Если эмбрион имеет мутации в программе («блок развития»), то далее он не развивается. Это происходит примерно в 20% случаях.

Причиной «блока развития» может быть низкокачественная семенная жидкость или яйцеклетка. Изначальное неудовлетворительное развитие эмбриона свидетельствует о проблемах с яйцеклеткой, если эмбрион «страдает» с третьих суток культивирования, то сперма была ненадлежащего качества. «Блок развития» – это так называемый естественный отбор, эволюционный спасительный механизм, который останавливает развитие некачественных эмбрионов. Как в дальнейшем будет развиваться и расти эмбрион зависит от сформированного генома и своевременности начала его функционирования.

Эмбрион на третий день

День четвертый

К этому сроку эмбрион содержит до восьми бластомер. Клетки контактируют значительно активнее, поверхность у эмбриона немного сглаживается. Культивирование эмбриона третьи сутки характеризуется началом такого процесса, как компактизация, когда границы эмбриональных клеток различить невозможно. Компактизация бывает частичная или полная. Если этот процесс произошел на второй день, то возможно эмбрион развивается неправильно, с отклонениями, что отображается в эмбриологическом протоколе. Готовится переход эмбриона в бластоцисту.

В моруле (трехдневный эмбрион) содержится до 16 бластомеров.

При естественном зачатии на этом сроке эмбрион транспортируется из фаллопиевых труб в матку. По окончании четвертых суток происходит кавитация, когда внутри эмбриона образуется пустота. В процессе эмбрионального роста за пределы зародышевой оболочки выходит определенное количество клеток. Эти клетки при необходимости генетического исследования забирают на анализ. Диагностику проводит эмбриолог на 5–6 сутки, прокалывая зародышевую оболочку. Биопсия абсолютно безопасна для эмбриона и не вредит его развитию. До получения диагностических данных эмбрионы криоконсервируют.

Результаты исследования напрямую повлияют на дальнейшую «судьбу» эмбриона, характеристики которого никак не меняются после размораживания. Современные безопасные технологии замораживания биоматериала позволили широко внедрить в различные программы ВРТ генетическую диагностику. На четвертый день оценка эмбриона малоинформативна, но его можно оценить по численности компактизированных клеток. Чем больше таких клеток, тем вероятнее эмбрион станет бластоцистой.

Оценивание компактизации происходит по классам:

Не во всех лабораториях происходит оценка по такому критерию.

Четвертый день развития. Стадия морулы

День пятый

На данном этапе, включающем период с конца четвертого до начала шестого дня, морула, полость которой составляет половину своего объема, становится бластоцистой, состоящей из двух типов клеток:

Ооцит окружен блестящей оболочкой плотной консистенции (Zona pellucida), выполняющей две функции: она препятствует проникновению в яйцеклетку более одного спермия и удерживает вместе бластомеры. По мере роста внутриэмбриональная полость расширяется, приводя к разрыву оболочки, в результате чего происходит выход бластоцисты или «хэтчинг» (вылупление). На этом этапе оценка эмбриона происходит по таким критериям:

Качество обозначается цифрами (1–5), количество — буквами (А-С).

На пятый день бластоцисты переносят в матку или замораживают. Бластоцисты оценивают по степени зрелости (бластуляция):

Шестой день развития. Стадия бластоцисты

Оценка эмбриобласта

Важнейший критерий внутриклеточной массы (ВКМ) – плотность, сгруппированность. Эмбрион считается более качественным, если отмечается высокая плотность ВКМ.

Критерии трофэктодермы – количество и маленький размер:

Степень приживаемости эмбрионов в полости матки оценивают спустя две недели по исследованию крови на ХГЧ. Более достоверная информация будет получена с помощью УЗ-диагностики через три недели. Вероятность наступления беременности зависит во многом от качества имплантированных эмбрионов. Морфологические данные, используемые для оценивания эмбрионов, являются необходимыми и основными, но этого не всегда достаточно. Иногда при переносе высококачественных эмбрионов они не имплантируются. В других случаях при переносе эмбрионов невысокого качества наступает беременность. Поэтому эмбриологи используют дополнительные варианты оценивания, позволяющие спрогнозировать имплантацию.

Развитие эмбрионов является сложным трудоемким процессом, в котором нужно учитывать массу тонких нюансов, что под силу только высокопрофессиональным специалистам. Если в ходе проведения программы ЭКО удалось довести 40% эмбрионов до этапа бластоцисты отличного качества, то программа считается успешной.

В этом плане криотехнологии, применяемые в протоколах ЭКО, неоценимы, поскольку есть возможность не только перенести в матку высококачественные эмбрионы, но и заморозить оставшиеся. Это преимущество позволяет использовать криозамороженный биоматериал при следующем переносе, минуя несколько небезопасных для здоровья и дорогостоящих этапов.

Данная статья не может быть использована для постановки диагноза, назначения лечения и не заменяет прием врача.

Источник

Что такое фрагментация?

Качество эмбрионов оценивается в процессе культивирования и непосредственно перед переносом. И нередко среди характеристик качества эмбрионов звучит такая, как «степень фрагментации». Так что же это за явление — фрагментация?

Каждый раз перед переносом эмбрионов в полость матки врач клиники МАМА подробно рассказывает пациентке о полученных в программе ЭКО эмбрионах: их количестве и качестве. Качество эмбрионов оценивается в процессе культивирования и непосредственно перед переносом. И нередко среди характеристик качества эмбрионов звучит такая, как «степень фрагментации». Так что же это за явление — фрагментация?

Сначала коротко остановимся на строении бластомера — эмбриональной клетки.

Бластомеры, из которых состоит эмбрион, имеют то же строение, как и большинство соматических клеток взрослого организма.

Снаружи клетка окружена мембраной, а внутреннее содержимое клетки — цитоплазма, представлено гелеобразным веществом. В цитоплазму погружено ядро клетки, содержащее генетический материал. Также в цитоплазме находятся различные органеллы и органические вещества.

Цитоплазматическая фрагментация бластомера — это отделение от клетки фрагментов цитоплазмы, окруженных мембраной. При этом фрагменты не несут ядерного содержимого, то есть весь генетический материал остается в клетке.

Степень фрагментации характеризует количество образовавшихся фрагментов. Для ее оценки во всем мире разработано много классификаций, которые в общих чертах сходны

Степень фрагментации до 25% считается вариантом нормы, поскольку в большинстве случаев такие эмбрионы нормально развиваются и имплантируются. Большая степень фрагментации является признаком сниженной жизнеспособности эмбрионов, при этом, чем сильнее она выражена, тем хуже прогноз на дальнейшее развитие. Но, тем не менее, даже сильно фрагментированные эмбрионы в некоторых случаях могут дать нормальную беременность.

Каковы причины фрагментации? К сожалению, до конца этот вопрос еще не изучен и вызывает много научных споров. По своей природе причины фрагментации можно разделить на две категории: генетически обусловленные и не связанные с генетикой. В первом случае фрагментация возникает у эмбрионов, имеющих серьезные генетические нарушения. Такие эмбрионы, по закону природы, гибнут, и одним из проявлений клеточной гибели является фрагментация. При гибели генетически аномального эмбриона фрагментация, как правило, сильно выражена и наблюдается во всех клетках.

Если эмбрион генетически нормальный, то фрагментация может быть признаком нарушения физиологии отдельных клеток, реакции клеток на негативные воздействия (например, загрязнение окружающей среды, такие заболевания женщины, как ожирение, поликистозные яичники, эндометриоз, возрастные изменения в организме будущей мамы). Также к негативному фактору в период созревания яйцеклеток, из которых получен эмбрион, можно отнести гормональную стимуляцию овуляции. В своей практике клиника МАМА использует легкую или минимальную стимуляцию.

Снизить вероятность фрагментации эмбрионов, вызванную негативными воздействиями, возможно улучшенными условиями культивирования. В Клинике МАМА разработана новая система культивирования, позволяющая обеспечить лучшие условия окружающей среды для развивающихся in vitro эмбрионов.

В заключение хотелось бы отметить следующее:

Определить причину фрагментации по внешнему виду эмбриона невозможно. По степени фрагментации можно предположительно оценить жизнеспособность эмбриона. Чем выше степень фрагментации — тем больше вероятность генетических нарушений и гибели эмбриона.Фрагментация может быть обратимой, т.е. появившиеся фрагменты способны «возвращаться на место».Фрагментация может быть индивидуальной особенностью нормальных эмбрионов.

Елена Евгеньевна ЗАХАРОВА, эмбриолог Клиники МАМА

Источник

Что такое фрагментация?

Понедельник, 1 Июнь 2009

Каждый раз перед переносом эмбрионов в полость матки врач подробно рассказывает пациентке о полученных в программе ЭКО эмбрионах: их количестве и качестве. Качество эмбрионов оценивается в процессе культивирования и непосредственно перед переносом. И нередко среди характеристик качества эмбрионов звучит такая, как «степень фрагментации». Так что же это за явление – фрагментация?
Сначала коротко остановимся на строении бластомера – эмбриональной клетки.
Бластомеры, из которых состоит эмбрион, имеют то же строение, как и большинство соматических клеток взрослого организма.
Снаружи клетка окружена мембраной, а внутреннее содержимое клетки – цитоплазма, представлено гелеобразным веществом. В цитоплазму погружено ядро клетки, содержащее генетический материал. Также в цитоплазме находятся различные органеллы и органические вещества.
Цитоплазматическая фрагментация бластомера – это отделение от клетки фрагментов цитоплазмы, окруженных мембраной. При этом фрагменты не несут ядерного содержимого, то есть весь генетический материал остается в клетке.
Степень фрагментации характеризует количество образовавшихся фрагментов. Для ее оценки во всем мире разработано много классификаций, которые в общих чертах сходны
Степень фрагментации до 25% считается вариантом нормы, поскольку в большинстве случаев такие эмбрионы нормально развиваются и имплантируются. Большая степень фрагментации является признаком сниженной жизнеспособности эмбрионов, при этом, чем сильнее она выражена, тем хуже прогноз на дальнейшее развитие. Но, тем не менее, даже сильно фрагментированные эмбрионы в некоторых случаях могут дать нормальную беременность.
Каковы причины фрагментации? К сожалению, до конца этот вопрос еще не изучен и вызывает много научных споров. По своей природе причины фрагментации можно разделить на две категории: генетически обусловленные и не связанные с генетикой. В первом случае фрагментация возникает у эмбрионов, имеющих серьезные генетические нарушения. Такие эмбрионы, по закону природы, гибнут, и одним из проявлений клеточной гибели является фрагментация. При гибели генетически аномального эмбриона фрагментация, как правило, сильно выражена и наблюдается во всех клетках.
Если эмбрион генетически нормальный, то фрагментация может быть признаком нарушения физиологии отдельных клеток, реакции клеток на негативные воздействия (например, загрязнение окружающей среды, такие заболевания женщины, как ожирение, поликистозные яичники, эндометриоз, возрастные изменения в организме будущей мамы). Также к негативному фактору в период созревания яйцеклеток, из которых получен эмбрион, можно отнести гормональную стимуляцию овуляции. В своей практике наша клиника использует легкую или минимальную стимуляцию.
Снизить вероятность фрагментации эмбрионов, вызванную негативными воздействиями, возможно улучшенными условиями культивирования.
В заключение хотелось бы отметить следующее:
1. Определить причину фрагментации по внешнему виду эмбриона невозможно.
2. По степени фрагментации можно предположительно оценить жизнеспособность эмбриона. Чем выше степень фрагментации – тем больше вероятность генетических нарушений и гибели эмбриона.
3. Фрагментация может быть обратимой, т.е. появившиеся фрагменты способны «возвращаться на место».
4. Фрагментация может быть индивидуальной особенностью нормальных эмбрионов.

Источник

Цитоплазматическая фрагментация предимплантационных эмбрионов человека

1) Клиника репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР», Москва, Россия;
2) ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова», физический факультет, Москва, Россия

В настоящей работе предпринята попытка обобщить и систематизировать знания относительно феномена цитоплазматической фрагментации эмбрионов, раскрыть причины и механизмы ее возникновения, а также описать ее влияние на жизнеспособность эмбрионов и клинические исходы программ экстракорпорального ЭКО. Поскольку с фрагментацией эмбрионов человека чаще всего сталкиваются во время эмбриологического этапа программ ЭКО, само явление изучено недостаточно. Редкие попытки исследовать этот феномен были узко сфокусированы на связи фрагментации с апоптозом. Причинами такого ограниченного знания явились этические препятствия и практические трудности, связанные с использованием для экспериментов яйцеклеток и эмбрионов человека. Отсутствие подходящей модели среди эмбрионов животных и относительно низкая встречаемость и значимость фрагментации в экспериментальной эмбриологии (у эмбрионов мыши) также способствовали исключению феномена фрагментации как достойного объекта исследования. В обзор вошли данные, полученные за достаточно обширный период, и предпринята попытка всесторонне охватить тему, касающуюся фрагментации эмбрионов. Заключение. Несмотря на то что влияние низкой доли фрагментации (25–30%) снижает жизнеспособность эмбрионов. Результаты исследований по микрохирургическому удалению цитоплазматических фрагментов, его положительному влиянию на жизнеспособность эмбрионов и клинические исходы программ ЭКО являются спорными и требуют дальнейшего подтверждения.

В рамках программ экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), при культивировании эмбрионов in vitro, часто наблюдается их атипичное развитие. Появление плеоморфной популяции цитоплазматических фрагментов под zona pellucida является общей чертой ранних эмбрионов. У более чем 50% получаемых in vitro эмбрионов человека можно наблюдать присутствие цитоплазматической фрагментации, то есть наличие в перивителлиновом пространстве эмбриона фрагментов бластомеров различного размера, не содержащие ядра или содержащих фрагменты ядерного материала. Наблюдения показали, что наличие фрагментации часто сопровождается другими аномалиями в развитии, такими как мультиядерность бластомеров, дезорганизация и несоответствие размеров бластомеров стадии развития эмбриона, уменьшение межклеточной адгезии, увеличение толщины zona pellucida.

У эмбрионов человека, полученных посредством ЭКО, фрагментация была впервые описана в 1970 г. [1], однако этот феномен не является уникальным ни для метода ЭКО, ни для эмбрионов человека. Данное явление было описано как у эмбрионов человека, развивающихся in vivo [2–5], так и у эмбрионов практически всех видов млекопитающих, развивающихся в условиях как in vivo, так и in vitro.

Давно известно, что фрагментация эмбрионов человека ассоциирована со снижением их жизнеспособности [6] и представляет собой большую проблему в рамках повышения эффективности вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Причины возникновения фрагментации и ее влияние на жизнеспособность эмбриона являются актуальными вопросами как биологии развития, так и практической репродуктивной медицины.

Феномен фрагментации эмбрионов

В 70-х гг. прошлого века Эдвардс при in vitro культивировании эмбрионов человека наблюдал явление, которое он описал как «деление клеток без деления ядра» [1]. Этот феномен наблюдался как у развивающихся, так и у остановившихся в развитии эмбрионов.

В редких случаях фрагментация может возникать на стадии зиготы, перед сингамией, и связана с зиготической/эмбриональной остановкой в развитии. Значительная часть эмбрионов, подвергшихся фрагментации на стадии пронуклеусов, останавливаются в развитии на 1–2-й день либо становятся чрезмерно фрагментированными на 3-й день и непригодными ни для переноса эмбриона, ни для криоконсервации [7]. Цитоплазматическая фрагментация является наиболее распространенной аномалией развития эмбрионов человека, развивающихся in vitro.

Таким образом, фрагментация – это явление, в результате которого образуется плеоморфная популяция безъядерных/микроядерных/мультиядерных, ограниченных оолеммой цитоплазматических структур предимплантационного эмбриона, обнаруживаемых в перивителлиновом пространстве между бластомерами или между бластомерами и zona pellucida.

Фрагментация в условиях in vivo

Фрагментация не является феноменом, наблюдаемым исключительно в условиях in vitro. Эмбрионы различных видов животных, включая приматов и сельскохозяйственных животных, полученные in vivo, также могут быть фрагментированы.

Является ли фрагментация эмбрионов человека столь же распространенным явлением in vivo, как и in vitro, пока неясно. Информация о морфологических особенностях эмбрионов человека, развивающихся in vivo, весьма ограничена. С середины прошлого века было проведено 3 значимых исследования, которые отвечают на некоторые вопросы относительно феномена фрагментации эмбрионов, полученных in vivo [2–4].

В исследованиях Hertig (1954) 4 эмбриона были оценены как аномальные. Помимо присутствия многоядерных бластомеров, при анализе тонких срезов эмбрионов авторы обнаружили в них признаки «клеточной дегенерации или некробиоза», что можно интерпретировать как наличие фрагментации [2].

Ortiz и Croxatto (1979) ассоциировали феномен цитоплазматической фрагментации со «старением» неоплодотворенного ооцита: фрагментация была зафиксирована у 42% неоплодотворенных яйцеклеток, полученных через 96 ч и более, после овуляторного пика лютеинизирующего гормона (ЛГ) у женщин, воздерживающихся от половых контактов. Они также обнаружили 25 аномальных яйцеклеток, полученных из половых путей женщин, у которых были половые контакты. Неясно, была ли фрагментация вызвана «старением» неоплодотворенного ооцита или произошла после оплодотворения [3].

В исследовании Buster et al. (1985) было обнаружено, что 4 яйцеклетки, полученные при лаваже матки через 100 ч и более после овуляции у фертильных доноров ооцитов были полностью интактными. Другие 15 эмбрионов содержали от 2 до 16 бластомеров. Один 6-клеточный эмбрион имел полностью интактные, хотя и неравного размера, бластомеры. Некротический дебрис содержался в перивителлиновом пространстве одного 2-клеточного эмбриона (возможно, вследствие лизиса одного из бластомеров). Другой эмбрион, оцененный как 14-клеточный с неравномерным дроблением, мог фактически содержать цитоплазматические фрагменты, однако сейчас это уже трудно установить [4].

В целом фрагментация присуща эмбрионам, полученным как in vitro, так и in viv.

Источник