Цпд микробиология что это

Цпд микробиология что это

ЦПД — центр приёма данных Словарь: С. Фадеев. Словарь сокращений современного русского языка. С. Пб.: Политехника, 1997. 527 с. ЦПД центр психологической диагностики мед. ЦПД церебральное перфузионное давление мед … Словарь сокращений и аббревиатур

ЦПД — центр приёма данных цитопатогенное действие … Словарь сокращений русского языка

Отёк мозга — Отёк вещества головного мозга (тёмный участок) вокруг метаст … Википедия

Церебральное перфузионное давление — (сокращенно ЦПД) физиологический показатель характеризует уровень перфузии (кровоснабжения) головного мозга живых существ. Относится к одному из основных показателей нейромониторинга ЦПД определяется по формуле: ЦПД = среднее артериальное… … Википедия

Простой герпес — Простой герпес … Википедия

Гиперосмолярные растворы в комплексе лечения больных с внутричерепными кровоизлияниями — Одной из важных задач интенсивной терапии больных с внутричерепными кровоизлияниями, находящихся в критическом состоянии, является коррекция повышенного внутричерепного давления [1][2][3]. Увеличение внутричерепного давления (ВЧД) приводит к… … Википедия

Вирусные инфекции — инфекции (см. Инфекция) животных, включая человека, растений и бактерий, вызываемые вирусами. Общие закономерности этиологии, патогенеза, клиники, эпидемиологии В. и. такие же, как инфекций, вызванных бактериями, грибами и простейшими. Главные… … Словарь микробиологии

цифровая подпись — ЦПД Данные, добавленные к блоку данных, или криптографическое преобразование блока данных, которое позволяет получателю данных удостовериться в происхождении и целостности блока данных и обеспечить защиту от мошенничества, например, получателем.… … Справочник технического переводчика

ГОСТ Р 54135-2010: Экологический менеджмент. Руководство по применению организационных мер безопасности и оценки рисков. Защита экологических природных зон. Общие аспекты и мониторинг — Терминология ГОСТ Р 54135 2010: Экологический менеджмент. Руководство по применению организационных мер безопасности и оценки рисков. Защита экологических природных зон. Общие аспекты и мониторинг оригинал документа: 3.1 биоаккумуляция: Процесс… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

Мониторинг оксигенации головного мозга — МОНИТОРИНГ ОКСИГЕНАЦИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА[1] является важнейшим компонентом нейромониторинга больных с внутричерепными кровоизлияниями, находящихся в критическом состоянии. К методам оценки оксигенации и метаболизма головного мозга относят:… … Википедия

Источник

Индикация вирусов

Для выявления (индикации) вирусов применяются следующие методы.

Индикация вирусов в культуре клеток осуществляется, прежде всего, по цитопатическому действию (ЦПД) вирусов, сроки и характер которого зависят от свойств вируса, проявляясь дегенеративными изменениями клеток с последующей их гибелью и отслаиванием от стекла (рис. 29).

Полная дегенерация клеток сопровождается значительными изменениями в виде пикноза ядра и цитоплазмы, отслаиванием клеточного монослоя от стекла.

Частичная дегенерация культур клеток может протекать по следующим типам:

— гроздеобразования (округление, увеличение и слияние клеток с образованием гроздевидных скоплений, типично для аденовирусов),

— очаговой деструкции (очаги пораженных клеток на фоне в целом сохранившегося монослоя), характерной для вирусов гриппа;

— симпластообразования (слияние клеток с образованием гигантских многоядерных клеток в виде симпластов или синцитиев, характерных для вирусов кори, паротита, парагриппа, респираторно-синцитиального, герпеса, иммунодефицита человека).

Пролиферативный тип ЦПД с трансформацией клеток в злокачественные, обладающие неограниченными потенциями к росту, способны вызывать онкогенные вирусы.

Сроки, в течение которых наступает ЦПД, вариабельны (например, 1-2 дня у полиовирусов, 7-14 суток у аденовирусов).

Если в инфицированных культурах клеток ЦПД отсутствует или слабо выражено, проводят «слепые пассажи», т.е. заражают культуральной жидкостью новые культуры клеток.

Рис. 29. Культура клеток почек обезьян (а – незараженная, б – цитопатическое действие вируса) х 200

Индикация вирусов с помощью реакции гемадсорбции (РГад).

Индикация вирусов по цветной пробе.

Принцип метода основан на определении кислых продуктов метаболизма, накаливающихся в клетке в процессе ее жизнедеятельности с помощью индикатора фенолового красного, меняющего свой цвет с красного в щелочной среде на оранжево-желтый в кислой среде. При заражении культуры клеток вирусами, вызывающими ЦПД (например, аденовирусы, энтеровирусы и др.), ме­таболизм клеток подавляется, рН среды не меняется и она остается окрашенной в красный цвет.

Индикация вирусов по внутриклеточным включениям.

Индикация вирусов с помощью прямой РИФ – выявлениевирусных антигенов, находящихся в инфицированной клетке культуры ткани, с помощью антител диа­гностической иммунной сыворотки, специфических иммуноглобулинов или моноклональных анти­тел, меченых флюорохромом, обычно флюоресцеином (рис. 30).

Индикация вирусов с помощью электронно-микроскопического метода (ЭММ) применяется, в основном, в научных исследованиях. Материал для ЭММ концентрируют различными методами (ультрацентрифугирование, хроматография на колонках, адсорбцией с помощью специальных сор­бентов или антител – для метода иммунной электронной микроскопии). ЭММ позволяет обнаружить в ядре или цитоплазме клеток отдельные вирионы, а также их скопления. В практических целях ЭММ может быть полезен для индикации и идентификации вирусов с типичной морфоло­гией (оспенные вирусы, ротавирусы, коронавирусы, ВИЧ и т.д.).

Рис. 30. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) – выявление вирус-специфических антигенов. х 900

Для постановки этой пробы вирусную суспензию в разных разведениях вносят в культуры ткани, находящиеся в плоских сосудах, после чего монослой клеток заливают гелем (слой агара или бентонита с индикатором нейтральным красным). Время бляшкообразования для большинства вирусов, обладающих ЦПД, варьирует от 36 до 48 ч. Бляшки выглядят в виде неокрашенных светлых пятен на розово-красном фоне окрашенного монослоя. В бентонитовом методе монослой клеток молочного цвета, бляшки прозрачные.

Индикация вирусов в куриных эмбрионах.

Определение титра вирусов можно проводить также на хорионаллантоисной оболочке.Для этого в лунки стерильных полистироловых пластин помещают кусочки скорлупы 11-12-дневного куриного эмбриона с неповрежден­ной ХАО, добавляют вирусосодержащую жидкость в десятикратных разведениях на буфере, накрывают пластины фоль­гой и инкубируют при 35-37 0 С в течение 24-72 часов. После этого скорлупу удаляют, добавляют 0,5% взвесь куриных эритроцитов и производят учет реакции по эффекту гемагглютинации, который свидетельствует о репродукции вируса.

Рис. 31. Реакция гемагглютинации для выявления вируса гриппа в хорион-аллантоисной жидкости куриного эмбриона.

Индикация вирусов в организме лабораторных животных находится в зависимости от вируса и вида чувствительного лабораторного животного, будет описана в лабораторной диагностике конкретных вирусных инфекций.

Учет вирусиндуцированных патологических изменений в чувстви­тельных живых системах.

Изучение антигенных свойств вирусов в серологических реакциях с противовирусными сыворотками является основным методом идентификации вирусов. Для этого используют ряд иммунологических реакций.

Реакция нейтрализации основана на способности антител нейтрализовать инфекционную активность вирусов в культурах ткани, РКЭ, чувствительных лабораторных животных. Из вирус-содержащего материала готовят десятикратные разведе­ния и добавляют к ним специфическую сыворотку в разведении в соответствии с титром, указанным на этикетке ампулы. Смеси вирус-сыворотка инкубируют 30 — 60 мин при 37 °С для обеспече­ния связывания антигенов с антителами, после чего смесью за­ражают культуру ткани, куриные эмбрионы или лабораторных животных. Контролем является чувствительная биосистема, заражен­ная вирусом без сыворотки.

Другим вариантом РН является цветная проба. Положительный результа­т пробы в случае соответствия вируса противовирусным антителам проявляется блокадой репродукции вируса, клетка при этом остается жизнеспособной, вырабатывая кислые продукты метаболизма, под влиянием которых цвет индикатора (фенолового красного) меняется с красного на желтый. Для постановки пробы в пробирки вносят по 0,25 мл рабочего разведения вируса и соответствую­щую антисыворотку.

Реакция торможения гемаггяютинации (РТГА) является одним из вариантов РН и ос­нована на нейтрализации гемагглютинирующих свойств вирусов специфичес­кими антителами, что проявляется отсутствием агглютинации чувствительных эритроцитов с формированием на дне пробирки или лунки полистиролового планшета компактного осадка вместо «зонтика». РТГА используется как для определения антител в качестве метода серологической диагностики, так и для идентификации вирусов, обладающих гемагглютининами. Феномен РТГА проявляется в образова­нии компактного осадка эритроцитов вместо «зонтика» гемагглютинации.

Реакция торможения гемадсорбции (РТГадс) ос­нована на нейтрализации эффекта адсорбции эритроцитов на по­верхности клеток, инфицированных вирусами, способными вызывать гемадсорбцию. Для постановки реакции по 0,2 мл специфической сыворотки, разведенной 1:5, вносят в пробирки, инкубируют 30-60 мин в термостате при оптимальной для данного вируса температуре, затем добавляют по 0,2 мл 0,5% взвеси эритроцитов. Контрольные пробы содержат неиммунную сыворотку и эритроциты. Пробирки снова инкубируют 20-30 мин, после чего производят учет реакции. Идентификация вируса основывается на признаке отсутствия адсорб­ции эритроцитов на клетках в присутствии иммунной сыворотки при наличии гемадсорбции в конт­рольных пробирках.

Для антигенной идентификации вирусов в клетках культу­р тканей используются также РПГ, РСК, РИФ, РОПГА ИФА, РИА со специфическими иммунными противовирусными сыво­ротками или моноклональными AT.

— выявление вирусной НК методами генодиагностики с помощью метода молекулярной гибридизации и ПЦР;

— электронно-микроскопическое изучение вирусов (см. выше).

Источник

Методы индикации вирусов при культивировании их в организме лабораторных животных

Индикацию, т.е. обнаружение факта размножения вируса, устанавливают на основании развития типичных признаков заболевания, патоморфологических изменений органов и тканей животных или положительной реакции гемагглютинации (РГА).

Что такое цпд? Виды цпд?

Виды: 1. Равномерная мелкозернистая деструкция клеток

2. Очаговая мелкозернистая дегенерация клеток

З. Гроздевидная дегенерация клеток (аденовирусы).

4. Крупнозернистая равномерная деструкция клеток

5. симластообразование (вирус кори).

Механизм РГА и РГАдс

ЦВЕТНАЯ РЕАКЦИЯ МЕХАНИЗМЫ

При репродукции в ткани вирусов клетки гибнут и цвет среды не меняется. Добавление специфической сыворотки нейтрализует вирус, гибель клетки не происходит и индикатор ( феноловый красный) в кислой среде меняет свой цвет с малинового на желтый. При росте клеток, не пораженных вирусом, происходит накопление кислых продуктов метаболизма что приводит к изменению рн среды и цвета индикатора

29)Метод бляшек механизм. В основе метода лежит образование в местах цитопатогенного действия вируса обесцвеченных пятен, так как пораженные клетки теряют способность сохранять или воспринимать витальные окрашивания. Пятна, или бляшки, представляют собой изолированные колонии вируса в однослойных культурах, видимые микроскопиически в виде неокрашенных округлых форм, четко выделяющиеся на фоне живых клеток, окрашенных в красный цвет.

33. Деконтаминация—процесс уничтожения микробов в (на) каких-либо объектах. Д. осуществляют дезинфекцией или стерилизацией. Цель в медицине – отрыв путей передачи, опосредованных мед.оборудованием или действиями врача, и снижение риска передачи инфекционных заболеваний.Воздействие на клеточные стенки гр+ бактерий и грибов должно состоять в разрушении оболочки из пептидогликана или хитина, так же в учете наличия в кл.стенкетейхоевых кислот. Разрушение пойдет по пептидным связям, по кислородным мостикам между гликозидными кольцами. Оболочка споры из денатурированного белка, следовательно мало нарушить структуру белка, надо разрушить вторичну структуру белка, по ковалентным связям: окислять амикислотные остатки или разрывать пептидные связи. У гр- над пептидогликановой оболочкой есть еще внешняя мембрана, где ЛПС, липопротеины и белки-порины. Необходимо определить мин.плотность необходимых нарушений хим.связей для нарушения целостности, стабильности и связаностикл.стенок. У вирусо надо не только разрушить белковую оболочку, но и уничтожить наследственную информацию. У вироидов белковой оболочки нет, только наслед.материал. Для уничтожения приона необходимо разрушить все молекулы, образующие его.

34. Физические факторы деконтаминации: температура, высушивание, фильтрование, лучистая энергия (уф и ионизирующее излучение), ультразвук, ионизированная плазма. Хим. Факторы: атибиотики, антисептики, дезинфектанты, консерванты, фенолы, галогены, спирты, ПАВ, соли тяж.металлов, красители, окислители, кислоты и щелочи, альдегиды.

35. Методы дезинфекции:

Механический, физический метод заключается в высокотемпературной обработке.Химический, биологический метод основан на использовании антагонизма различных видов микроорганизмов. Так, при использовании бактериофагов, то есть вирусов бактерий, уничтожаются стафилококки, синегнойная палочка, брюшнотифозные бактерии и т. д. Методы стерилизации: тепловая (прокаливание.Сухой жар, под давлением, текучий пар), газовая, химическая (перекись водорода, хлоргексидин, формальдегид, спирт), ультразвуком, уф и гамма-излучением, плазмой.

36.Предстерилизационная очистка предусматривает окончательное удаление остатков белковых, жировых, механических загрязнений и остаточных количеств лекарственных препаратов.Предстерилизационной очистке должны подвергаться все изделия, подлежащие стерилизации.Этапы предстерилизационной очистки: 1: промывание проточной водой после дезинфекции над раковиной в течение 30 секунд до полного уничтожения запаха дезсредств; 2: замачивание в моющем растворе при температуре воды 50°С на 15 минут шприцев и головок в разобранном состоянии; 3: мытье каждого изделия в этом же растворе, где проводилось замачивание, с помощью ерша в течение 30 секунд;4: споласкивание проточной водой; 5: споласкивание дистиллированной водой в течение 30 секунд;6: просушивание горячим воздухом при температуре +75..+87 в сушильных шкафах. Контроль качества методы: визуальный, бактериологический, химический, йодно-крахмальный. В материале после дез. И стерилиз. Должен быть хлор.

Хим факторы: Антибиотики- вещ-ва. Блокирующие ферментативный процесс в клетке,или разрушает основные ее структуры. Гликопротеиновой или протеиновая структура..Бактериоцины- в-ва, белковой природы,короткие пептидные цепочки, без ферментативной активности., действуя через специф. или неспециф. Клеточные рецепторы. Токсические продукты метаболизма- ислоты, эфиры, амины, сероводород, перекись. Формирование биопленки.

№41. Классификация антибиотиков по происхождению.1)из грибов, например рода Penicillium (пенициллин), рода Cephalosporium (цефалоспорины) 2)из актиномицетов; группа включает около 80% всех антибиотиков. Среди актиномицетов основное значение имеют представители рода Streptomyces, являющиеся продуцентами стрептомицина, эритромицина, левомицетина. 3)Антибиотики, продуцентами кт являются собственно бактерии.Bacillus и Pseudomonas,полимиксины, бацитрацины, грамицидин.4) животного происхождения; из рыбьего жира получают эктерицид, из молок рыб – экмолин, из эритроцитов – эритрин. 5) растительного происхождения. которые выделяют лук, чеснок, сосна, ель, сирень, другие растения. Антимикробным действием обладают многие растения, например, ромашка, шалфей, календула.

Вопрос 42

Бактерицидное или фунгицидное, вызывающие гибель бактерий или грибов (бета-лактамы, фторхинолоны,полиены)

Бактериостатические или фунгистатические(макролиды, тетрациклины, азолы)

Вопрос 43

Выделяют антибиотики, нарушающие синтез клеточной стенки бактерий, нарушающие структуру и синтез клеточных мембран, ингибиторы биосинтеза белка и дыхания, ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот, процессов репликации, транскрипции и трансляции

Вопрос 45

На поверхность агаровой среды в чашке петри наносят бактериальную суспензию определённой плотности и затем помещают диски, содержащие антибиотики такой концентрации, которая обуславливает стандартный диаметр зон задержки роста чувствительных тест- бактерий. Перед посевом чашки со средой подсушивают в термостате для лучшей диффузии препаратов в пит. Среду. Каждый диск прижимают пинцетом. Диски на равном расстоянии др от др 2-2,5 см от края чашки. При помещении диска на пит среду антибиотик диффундирует в агар. Большая конц антибиот наблюдается в месте диска. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. Чашки с посевом инкубируют в термостате 35-37гр в течение ночи. Результат учитывают путём измерения диаметра зоны торможения роста бактериальной культуры. Измерение производят циркулем или миллиметровой линейкой или спец трафаретом. При зоне задержки роста диаметром до 10мм штамм расценивается как малочувсвительный к исследуемому антибиотику; более 10мм-слабочувствительный; 10-20мм-чувствительный; более 20мм-высокочувствительный.

46.Метод серийных разведений: сущность сводится к выявлению роста исследуемой микробной культуры в ряде пробирок с питательной средой, содеджащий разные концентрации антисептиков. Этот метод определяет МПК, при кот. ингибируется рост изучаемого микроорганизма. Для разведения препаратов используют стандартные питательные среды (сердечно-мозговой бульон, рН 7,2-7,4), кот. обеспечивают оптимальные условия роста исследуемого вида и не содержат веществ, подавляющих действие антибиотиков. В приготовленные разведения препаратов вносят культуры микроорганизмов в логарифмической или ранней стационарной фазе роста. Для большинства патогенных видов бактерий этот период соответствует 16-18 часов роста. Бульонную культуру исследуемых бактерий в бульоне добавляют в объеме 1 мл к каждому разведению препарата. При э этом концентрация препарата в первом разведении становится в 2 раза ниже. Все исследования сопровождаются контролем – пробирка, содержащая 1 мл бульона и 1 мл культуры каждого испытуемого штамма без добавления препарата. После внесения микробной культуры штатив помещают в термостат и инкубируют при t= 37 C, 3-5 суток. Наличие роста микроорганизма в бульоне (помутнение бульона) свидетельствует о том, что данная кончентрация антибиотика недостаточна, чтобы подавить его жизнеспособность. По мере увеличения кнц. антиб. в руду пробиров рост микроорганизма ухудшается. МПК принято считать первую наименьшую концентрацию антибиотика, где визуально не определяется бактериальный рост.

ОСОБЕННОСТИ

n Хромосомы располагаются свободно в цитоплазме, суперспирализированы, уложены в виде кольца и прикреплены к ЦПМ.

n Передача генетического материала происходит по вертикали и горизонтали.

n Имеются внехромосомные факторы наследственности.

ОРГАНИЗАЦИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА У БАКТЕРИЙ

n нуклеоид (бактериальная

хромосома): жизненно важные признаки

n внехромосомные факторы наследственности: не жизненно важные признаки

ВНЕХРОМОСОМНЫЕ ФАКТОРЫ НАСЛЕДСТВЕННОСТИ

n автономные – являются репликоном: плазмиды

ВСТРАИВАНИЕ В НУКЛЕОИД ВНЕХРОМОСОМНЫХ ФАКТОРОВ НАСЛЕДСТВЕННОСТИ

n в гомологичных участках: плазмиды, умеренные фаги

n в любых участках: транспозоны, IS-последовательности

48. ПЛАЗМИДЫ-внехромосомные автономные кольцевые и суперспирализованные молекулы ДНК, размеры которых 1,5 до 200 мД

-регуляторная – компенсирует нарушение функции ДНК нуклеоида

-кодирующая – вносит в генотип новую информацию

n возможные состояния

-автономное (в цитоплазме)

-интегрированное (в нуклеоиде)

n содержание tra-оперона

-Конъюгативные (трансмиссивные) плазмиды (содержат)

-неконъюгативные (мобилизируемые) плазмиды

n детерминирует образование конъюгативных пилей

n моблизирует на перенос

-саму конъюгативную плазмиду (F+)

-другую, неконъюгативную, плазмиду (RTF)

-участок нуклеоида (Hfr)

Виды плазмид и кодируемые признаки

-Hly-плазмида –синтез гемолизинов

-Tox-плазмиды – синтез токсинов

-F-плазмида – передача генетической информации

-Плазмиды биодеградации – разрушение субстратов (белков, сахаров)

Общемедицинское значение плазмид

-Контролируют синтез факторов патогенности, в том числе у представителей нормальной микрофлоры тела человека

-Участвуют в распространении генов резистентности к химиотерапевтическим средствам и дезинфектантам, что лежит в основе формирования госпитальных штаммов

49.ТРАНСПОЗОНЫ-нуклеотидные последовательности (от 2 000 до 20 000 пар нуклеотидов), способные менять место своей локализации в молекуле ДНК и мигрировать из одной молекулы ДНК в другую

n состояние в бактериальной клетке

1. интегрированное в репликон (реплицируется вместе с ним)

2. автономное (замыкается в кольцо и не реплицируется)

1. особые концевые структуры, которые отличают транспозон от др. фрагментов ДНК (маркеры транспозона)

2. гены транспозиции

3. гены, детерминирующие синтез

-ферментов, обеспечивающих устойчивость к антибиотику

-белков, обеспечивающих др. признаки

1. координация взаимодействия внехромосомных факторов наследственности между собой и с бактериальной хромосомой для обеспечения их рекомбинации

2. регуляторная (регуляция транскрипции генов путём их «включения/выключения»)

3. индукция мутаций (инверсии, дупликации на протяжении 5-9 пар нуклеотидов)

IS-ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ_вставки нуклеотидных последовательностей (порядка 1 000 пар нуклеотидов)

n отличия от транспозонов

1. содержат только гены транспозиции

2. не обнаружены в свободном состоянии

1. координация взаимодействия внехромосомных факторов наследственности между собой и с бактериальной хромосомой для обеспечения их рекомбинации

2. регуляторная (регуляция транскрипции генов путём их «включения/выключения»)

3. индукция мутаций (инверсии, дупликации на протяжении 5-9 пар нуклеотидов)

Модификационная изменчивость вид изменчивости,которая не передается по наследству и изменения которой затрагивают лишь фенотип(.

Разлачают: 1)изменчивость,провляющаяся только при действии индуцирующего фактора.2)Сохраняющееся после действия фактора.эта делится на длительнаю,кратковременную.

Длительные-наблюдаются в течении ряда поколений после того,как индуцирующий фактор перестал действовать.

Кратковременные- сохраняются только в первых генерациях после устранения вызвавшего их фактора.

Мутационная изменчивость.По происхождению: спонтанные(естественные) и индуцированные(эксперементальные). По локализации: хромосомные(несколько генов),генные,точковые.

В хромосомных выделяют: Делеции(выпадение большого кол-ва нуклеотидов),Инверсии( поворот уч-ка ДНК на 180),Дупликации(повторение уч-ка хромосомы).

Мутации,возникающие как следствие изменения в азотистых оснований в молекуле ДНК,приводят к утрате или изменению какой-либо функции.

При этом изменение формы колонии является внешним проявлением изменений свойств образующих ее бактериальных клеток. У бактерий, в норме образующих R-формы колоний, также наблюдается диссоциация, которая, проявляется появлением S-форм колоний. Однако, механизм RS-диссоциации не известен и этот вид диссоциации здесь не рассматривается.

А. По своему механизму SR-диссоциация – это инсертационная мутация, приводящая к утрате генов, контролирующих синтез полисахаридных звеньев ЛПС наружной мембраны клеточной стенки. Из-за этого все свойства, функционально связанные с клеточной стенкой (форма, наличие капсулы и жгутиков, чувствительность к бактериофагам, метаболическая активность и т.д.) изменяются и как конечный результат – изменяется форма колонии.

Б. Диссоциация имеет для бактерий важное биологическое значение.

1. R-формы колоний более устойчивы к физико-химическим факторам внешней среды.

2. S-формы более устойчивы к фагоцитозу и действию антител.

В. Диссоциация значительно усложняет выделение и идентификацию чистой культуры. В этом заключается большое значение диссоциации для микробиологической диагностики.

МУТАГЕНЫ

Определение

Химические вещества или физические факторы, вызывающие предмутационные изменения в ДНК, которые в результате ошибок репарирующих ферментов или в процессе репарации переходят в мутацию.

1. Физические (УФ-излучение, R-лучи)

2. Химические (бензпирен, азид натрия, 5 бромурацил, 2 аминопурин, азотистая кислота)

3. Биологические (транспозоны, µ-бактериофаги, Is –элементы)

КЛАССИФИКАЦИЯ МУТАГЕНОВ

По механизму действия

1. аналоги азотистых оснований ð замена пар оснований

2. акридиновые красители ð выпадения или вставки оснований

3. УФ, некоторые продукты микробного метаболизма ð нарушение работы ДНК-полимеразы ð образование тиминовых димеров

4. нитрозосоединения ð множественный эффект («супермутагены»)

55 РЕПАРАЦИИ

Определение

Процесс восстановления повреждённой ДНК ферментами репарационных систем

Виды репарационных систем

n Система фотореактивации – ферменты активны в присутствии видимого света

n Система темновой репарации – ферменты действуют в темноте

Этапы репарации

n Обнаружение и надрезание поврежденного фрагмента ДНК эндонуклеазой

n Удаление вырезанного фрагмента ДНК-полимеразой 1

n Синтез нуклеотидов по матрице второй сохранившейся нити – работает ДНК-полимераза 1 и 3

n «Сшивание» восстановленного фрагмента ДНК с основной нитью за счет лигазы

56 РЕКОМБИНАЦИОННАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ У БАКТЕРИЙ

Определение

Изменчивость, происходящая в результате включения в ДНК реципиентной клетки участка ДНК донорской клетки

Виды рекомбинаций

n Законная – происходит спаривание гомологичных генетических структур за счет образования водородных связей между комплементарными нуклеотидами

Источник